ZGA398大孔强碱性阴离子交换树脂
粗品肝素的酶解生产工艺
一、 酶解、吸附
刮取小肠黏膜(每根小肠黏膜加水3~4千克,绞碎短头,合并)入反应锅,加盐(NaCl)2.5%左右,加(NaOH)调整pH至9~9.5,加蛋白酶每根小肠加2.5~3克。加温至52℃,调整盐度为2.5~3度,保温2~3小时。再加温至85℃,保温15分钟,过滤去料。
滤液冷却至60℃,投放树脂(按每根小肠20~25克左右投放),搅拌,待吸附液冷却至52℃,补加蛋白酶(每根小肠按0.8~1.0克加入),吸附8~10小时,吸附完毕,用100目布袋过滤,收集树脂。
二、 洗涤
1. 用自来水漂洗树脂数次至无杂质为止。
2. 树脂用热水(50~60℃)调pH至8.5,反复洗涤数次,至洗涤液澄清为止。将树脂沥下。
3. 用2倍量氯化(NaCl)溶液洗涤(盐浓度为5%,调pH为8~8.5),加温至50~60℃,洗涤1小时,去除洗涤液,将树脂沥下。
三、 洗脱
用24%的氯化洗脱二次。**次用树脂1.5倍量的洗脱液,温度为50~60℃,搅拌时间为4小时,过滤出树脂,收集洗脱液。*二次用树脂1倍量的洗脱液,温度为50~60℃,搅拌时间为2小时,洗脱完毕收集树脂,合并洗脱液。树脂用24%氯化溶液浸泡过夜,次日用于*二次洗脱。
四、 沉淀
1. 脱盐
上述洗脱液用85%的回收酒精沉淀,体积为1:1,搅拌加入酒精相当于40%的浓度,沉淀8小时,温度20℃。沉淀完毕,倾去上清液。
2. 沉淀吊滤
沉淀用100℃开水溶解,加1倍量酒精沉淀,相当于45%,沉淀4小时以上。
五、 干燥
上述沉淀物以95%的酒精洗涤,在80℃温度下,真空干燥或用蒸汽干燥 。
六、 树脂的处理与再生
1. 新树脂
用清水将树脂洗涤三次,用25~30℃清水浸泡过夜,次日再以清水洗涤数次,沥干后待用。
2. 用过的树脂
用清水将树脂漂洗干净,除去树脂外表的杂质。用2倍树脂体积的碱性食盐水(8%NaOH+20%NaCl混合溶液),在40~50℃温度下,浸泡2小时(中间经常搅拌)。用清水洗涤至中性,沥干后待用。